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Mostrando entradas de octubre, 2023

Lophomonas sp

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  Lophomonas sp a 400X, más aumento digital. Lophomonas sp a 10X Lophomonas sp a 400X La historia de esta muestra es que corresponde a un aspirado bronquial que se le realiza a mi padre, una muestra fue procesada en la Clínica y otro frasco me lo alcanzó mi hermano que se encontraba con mi padre, que ya tenía días hospitalizado en la clínica; Las imágenes de las fotos son 72 horas después de haber obtenido la muestra. La primera vez que revisé la lámina en coloración Gram observé leucocitos, levaduras y pseudohifas y se aisló una Candida albicans. Pero en la clínica reportaron la Lophomonas sp; yo no la observé; en el Hospital Carrión en algunas muestras solicitaban buscar este parásito; lo único que se observaban eran células ciliadas. Entonces después de 3 días al enterarme de lo reportado vuelvo a observar la muestra en examen directo y se encuentran las Lophomonas sp en la muestra que están dentro del círculo morado para que puedan ubicarla, son totalmente diferentes a las célu...

Cuándo nos sorprende la observación microscópica de un Líquido Pleural.

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  Gancho de Echinococcus granulosus (Quiste Hidatídico). Un 15 de Octubre de 2018, observamos esta imagen del sedimento de un líquido pleural de un paciente de Emergencia y nos llamó la atención la estructura que está en el centro y que también se apreció en otros campos. Coloración Gram Cómo Docente de Microbiología siempre le digo a mis alumnos que siempre debemos estar preparados, en estos tiempos que un alumno observa el microscopio, toma la foto y la pasa a su grupo de mesa; no es lo mismo que visualizar directamente de los oculares del microscopio; por eso los fastidio siempre OBSERVEN EL MICROSCOPIO ENFOQUEN Y MANEJEN EL MACRO-MICROMÉTRICO, EN SU MEMORIA RECORDARÁN EL TAMAÑO DE LA ESTRUCTURA Y SU RELACIÓN CON EL RESTO CÉLULAS QUE TIENEN LOS CAMPOS 

Cuándo el examen directo de hongos te da sorpresas.

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  Demodex brevis Demodex folicullorum (longus) En los raspados de piel sobre todo de mejillas que piden descartar hongos, cuando se realiza el examen directo con las escamas de piel obtenidas por el raspado, le hacemos el examen directo con KOH al 20% que permite disgregar la queratina y permitir la aparición de estructuras micóticas como hifas, artrosporas; pero a veces hallamos los microorganismos que se presentamos en las fotos, no tan nítidos se observa como una silueta que hace sospechar al observador experimentado que hay algo y que con la ayuda del KOH y un lapicero o lápiz, sobre laminilla para ayudar a separar las escamas y permite una mejor visualización más limpia cómo en las fotos. Recomendación:  Estar bien capacitado y entrenado para buscar y encontrar  lo que tiene la muestra; una cosa es mirar una foto y otras cosa es buscar en la lámina bajo el microscopio, hay varios factores que podrían condicionar que uno no lo visualice,  como no mirar con los do...

Coloración Vagó

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  Campylobacter bacteria que produce diarrea, en esta imagen es del desarrollo de un cultivo, de una colonia se realiza un frotis, fijado al calor y se colorea con Mercurio cromo al 2% (Merthiolate coloreado) por 3 minutos, se lava con agua y luego se colorea con cristal violeta por 3 minutos y se lava. Donde observamos bacilos curvos en formas de alas de gaviota, S itálica. Para los que hemos sido alumnos de algún curso de microbiología del Instituto de Medicina Tropical Daniel A. Carrión UNMSM, hemos realizado esta coloración en la práctica del curso, buscando espiroquetas de la flora normal del sarro dental obtenido de un mondadientes. Esta coloración Vagó, fue recopilada por el Dr. Rito Zerpa, un microbiólogo muy curioso, que si no me falla la memoria, la encontró en un libro antiguo de microbiología. En el Instituto Nacional del Niño de Breña, el Dr. Zerpa probaba estos hallazgos y luego los llevaba para la cátedra. Coloración Importante, porque de un frotis de heces de un pac...
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  Bacilos ácido alcohol resistentes Ooquiste maduro de Isospora belli en esa fecha, hoy en día Cystoisospora belli Ooquiste inmaduro de Isospora belli en esa fecha, hoy en día Cystoisospora belli Ooquiste de Cyclospora cayetanensis Ooquiste de Cryptosporidium sp  Coloracion Kinyoun:   Fucsina básica      4g Alcohol absoluto: 200 ml Filtrar solución A.   Fenol 8g Alcohol 95: 20 ml Agua destilada: 80ml     Solucion A: 10 ml Solucion B: 90 ml   Azul de metileno:  Azul de metileno: 3g Alcohol 70° 100 ml Para el decolorante Ácido clorhídrico concentrado: 3 ml Alcohol etílico 96°: 97 ml Con esta coloración, se cubre el frotis con la Fucsina fenicada 5 minutos, se lava con agua de caño, luego se decolora por 30 segundos o hasta el retiro de la Fucsina fenicada y luego se colorea con el colorante de contraste 1 minuto. La historia que me hizo recordar esta coloración, cuándo todavía era residente y el Dr. Jorge Candiotti estab...

Tinta China Rotring y Cryptococcus neoformans diferentes formas

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Coloración Gram Continuación........................ Cómo Reportar

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  Cuándo uno está observando una lámina de una muestra coloreada con la tinción de Gram debemos tener en cuenta: Tomado del  Clinical Microbiology Procedures Handbook. Observar al microscopio a 100X  (ocular de 10X y objetivo de 10X). Determinar el número de células (células epiteliales, leucocitos) en 20 a 40 campos del frotis. Saltar campos donde no hayan células y no promediar estos campos en el recuento.  Para el reporte: Se hace por número relativo. 1+ (raro o ocasional): menos que 1 por campo a menor aumento (10X) 2+ (pocos): 1 a 9 / (10X) 3+ (moderado): 10 a 25/ (10X) 4+ (muchos o numerosos): > 25/ (10X) Acompañar el recuento de células con la descripción de el tipo de células. Células epiteliales. Glóbulos blancos. Leucocitos Glóbulos rojos No se observan con la coloración Gram. Pus ( representa leucocitos aglutinados y degenerados). Para el recuento de bacterias y levaduras bajo aceite de inmersión y reportar un número relativo en las áreas asociadas con ...

Coloración Gram

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  La Coloración Gram, debe ser la tinción más usada en microbiología, tiene por finalidad observar morfología bacteriana y taxonomía; pero hay diferentes variantes así tenemos,  Gram Clásico. Gram-Kopelov. Gram-Hucker. Yo he tenido la oportunidad de evaluar las dos primeras y me inclino por usar Gram-Kopelov, para mí cuáles son las ventajas. Que se pueden acortar los tiempos de coloración que se puede realizar por 10 segundos. A la decoloración le damos unos 30 segundos. Para el colorante de contraste Fucsina Básica, su intensidad más brillante que la safranina más opaca favorece un mejor contraste en la observación. La modificación de Kopelov fue el uso de sustancias alcalinas facilitan la penetración del cristal violeta, en este caso usamos Bicarbonato de sodio. La otra variante es que no usa lugol sino una solución de yodo. Mayormente las muestras son fijadas al calor, con cuidado de preferencia se puede contar con un equipo nacional que regula un termostato y se puede esco...

El Dr. Rito Zerpa y su nueva visión

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 El Dr. Rito Zerpa Larrauri, fue un docente, investigador y maestro del Departamento de Microbiología Médica y del Instituto de Medicina Tropical Daniel A. Carrión de la UNMSM; muy curioso,  en una etapa se dedicó a la observación microscópica de microorganismos en una nueva visión, previa a la aparición de las cámaras digitales con alta resolución como las que hay ahora. Para la levadura capsulada Cryptococcus neoformans ideó la tinta china modificada (50% tinta china negra + 50% mercuriocromo), permitiendo ver mejor sus estructuras; les comparto las fotos que están en los siguientes links que corresponden a las revistas Anales de la Facultad de Medicina San Fernando UNMSM y Revista Peruana de Medicina Experimental y Salud Pública del Instituto Nacional de Salud. http://www.scielo.org.pe/scielo.php?script=sci_arttext&pid=S1025-55832003000400012 https://rpmesp.ins.gob.pe/index.php/rpmesp/article/view/436/2627
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  La Tinta China El uso de Tinta China, en los procedimientos microbiológicos, son importantes para la observación microscópica de microorganismos capsulados, entre ellos,  Cryptococcus neoformans,  mi experiencia en escoger la marca de tinta china para obtener una buena visualización es a través de la tinta china negra de la marca rotring. Comparada con la tinta china negra pelikan tiende hacer menos grumos, la intensidad del color negro es más con la rotring. Para usar una cantidad apropiada de tinta china, se debe realizar en una cabina de bioseguridad o por lo menos alrededor de un mechero de bunsen que garantice un ambiente de esterilidad y con el equipo de protección personal;  lo ideal es cuando uno procesa, tener dos láminas portaobjetos, una con el sedimento de la muestra que por lo general es un líquido céfalo raquídeo; y otra lámina donde se va colocar una gota de la tinta china, de ésta ultima con un asa de 10 microlitros previamente estéril de coge la ca...

Tener una buena rutina para qué en cualquier momento hacer una investigación

  Soy José María Miguel Guevara Granados, les entrego un resumen de mi CV: Médico Patólogo Clínico, supervisor de aseguramiento y control de calidad, en el Laboratorio de la Unidad de Ensayos Clínicos del Centro de Investigaciones Tecnológicas Biomédicas y Medioambientales (CITBM) de la UNMSM para las redes de HPTN y HVTN patrocinado por división de SIDA (DAIDS) de los Institutos Nacionales de Salud (NIH, USA) y del Instituto de Medicina Tropical Daniel A. Carrión de la UNMSM.  Profesor Asociado con más de 25 años de experiencia del Departamento de Microbiología Médica de la Facultad de Medicina UNMSM, tanto en el nivel de pregrado y postgrado. Investigador del Grupo de Tuberculosis y Enfermedades Emergentes y Reemergentes e Investigador Permanente del Instituto de Medicina Tropical Daniel A. Carrión de la Facultad de Medicina UNMSM.  Investigador permanente de la Sección Científica de Bacteriología y Micología del IMT DAC. Participación como responsable, corresponsable, ...